Viande d’huîtres congelées réparties à l’échelle internationale causant de multiples éclosions d’infections à norovirus en Australie

Contexte Entre novembre et janvier, des foyers de norovirus dans des juridictions australiennes impliquant des cas de maladie étaient associés à des viandes d’huîtres importées. Des études de cohortes ont été menées dans les juridictions pour identifier les risques relatifs de maladie pour la consommation d’huîtres. les études menées dans les premières juridictions ont identifié les risques relatifs de maladie du% d’intervalle de confiance, – et% intervalle de confiance, -, respectivement, pour la consommation d’huîtres Des souches multiples de norovirus ont été détectées dans les échantillons fécaux des patients et des lots La viande d’huître utilise des méthodes de réaction en chaîne par polymérase inverse de la transcriptase inverse Les études de dépistage ont révélé que toutes les viandes d’huîtres étaient récoltées dans le même système estuarien au cours du même mois. Ces épidémies démontrent le potentiel de propagation des maladies d’origine alimentaire au niveau international. Les maladies d’origine alimentaire liées au norovirus sont sous-estimées en raison de la sous-déclaration des cas humains et des difficultés de détection en laboratoire des virus dans les aliments, ce qui peut retarder les mesures de santé publique

Les norovirus, également connus sous le nom de virus de type Norwalk et de calicivirus humains, constituent un groupe génétiquement divers de virus à ARN de la famille des Caliciviridae et sont les causes les plus fréquentes de gastro-entérite épidémique dans les pays développés. La principale cause des épidémies d’infections à norovirus d’origine alimentaire est la transmission par les manipulateurs d’aliments malades, mais les eaux contaminées et les mollusques en particulier, les huîtres ont également été associées à Les huîtres sont des organismes filtreurs et, par conséquent, peuvent concentrer les virus si elles sont cultivées dans des eaux contaminées par des matières fécales Des éclosions d’infections à norovirus associées à la consommation d’huîtres ont eu lieu dans de nombreux pays zones de croissance et viande d’huître La majorité des foyers ont suivi la consommation d’huîtres crues s, bien que des huîtres cuites aient également été impliquées La courte durée de conservation des huîtres a signifié que la plupart des épidémies se sont produites localement; toutefois, des éclosions multistatiques ont également été signalées . Une augmentation de la consommation mondiale de produits de la mer a entraîné une augmentation de la distribution internationale des produits de la mer. On a également observé une augmentation du nombre de Les enquêtes sur les flambées épidémiques ont été facilitées par le développement de tests moléculaires pour les tests de norovirus dans les aliments. Cependant, le développement de la capacité des laboratoires et des tests sensibles La détection de norovirus dans les huîtres et autres mollusques est nécessaire Nous rapportons les résultats de recherches sur les épidémies de gastro-entérite en Australie-Occidentale, dans le Territoire du Nord et au Queensland entre novembre et janvier, associées à la consommation d’huîtres crues et cuites

Méthodes

Enquêtes épidémiologiques

Identification des foyers La gastroentérite est survenue chez des clients qui ont consommé des huîtres grillées cuites au restaurant dans le Territoire du Nord en novembre. En même temps, le Département de la Santé, Australie occidentale, a été informé des cas de gastroentérite chez les personnes qui avait consommé des huîtres crues utilisées dans les cocktails d’huîtres En janvier, plusieurs cas de gastro-entérite ont été signalés dans le Queensland suite à la consommation d’huîtres crues et cuites dans les hôtels. Tous les foyers ont été signalés aux départements de santé publique. Observation de cas de gastroentérite dans la communauté La consommation de viande d’huître importée a été supposée être la cause de toutes les éclosions. Recherche de cas humains Des études de cohorte rétrospectives ont été menées dans le Territoire du Nord et en Australie-Occidentale. Territoire restaurant et pour les participants à la fonction traiteur en Australie occidentale Une série de cas de clients malades avec des cas signalés au Département de la santé a été menée dans le Queensland. Aucun contact n’était disponible pour les autres participants dans les hôtels du Queensland. Un cas probable a été défini comme étant survenu chez une personne qui a mangé au restaurant, à la salle de réception ou à l’hôtel et a développé des vomissements, de la diarrhée ou des douleurs abdominales. par RT-PCR, qui a mangé au restaurant, à la réception ou à l’hôtel et a développé des vomissements, de la diarrhée ou des douleurs abdominales à l’intérieur de l’appareil. – Un cas secondaire a été observé chez une personne ayant: nausées, vomissements, diarrhée ou douleur abdominale un contact de ménage avait mangé des restaurants ou des centres de fonction Pour confirmer la date de début et la date de fin de l’épidémie du Territoire du Nord, les listes de dîners réservés En raison des limites de ressources, seules les personnes qui ont mangé les vendredis et samedis soirs entre octobre et novembre ont été interviewées. Cependant, tous les clients qui ont mangé au restaurant entre novembre et décembre ont été interviewés. En Australie-Occidentale, tous les clients assistant à la fonction ont été contactés pour des interviews. Des enquêtes ont été menées par téléphone et interrogées sur des enquêtes épidémiologiques d’origine alimentaire dans le Territoire du Nord, en Australie occidentale et au Queensland. On a demandé au Queensland s’ils avaient mangé l’un des aliments servis dans les restaurants Northern Territory, Western Australia ou Queensland. Les autres questions posées comprenaient l’histoire clinique, les données démographiques, l’historique des contacts et si d’autres contacts étaient indisposés. nto et analysé avec le logiciel Stata, version Stata Corporation Les taux d’attaque spécifiques aux aliments, les risques relatifs de maladie associés à la consommation de différents aliments à la fonction et au restaurant, et les IC% ont été calculés Une valeur P de & lt; a été considéré comme statistiquement significatif

Méthodes de laboratoire

Des échantillons de selles ont été testés pour des bactéries et des parasites dans les laboratoires des états et territoires locaux et ont été envoyés aux laboratoires de référence pour des tests viraux, y compris des tests de norovirus par des méthodes de RT-PCR. RT-PCR nichée à tube unique avec des contrôles appropriés pour détecter la présence du génogroupe II de norovirus, décrite ailleurs Tests d’huîtres Des sacs d’huîtres provenant des lots impliqués dans les foyers ont été transportés congelés vers des laboratoires en Australie et en Nouvelle-Zélande. Le laboratoire néo-zélandais a utilisé une méthode de digestion des protéases pour récupérer les norovirus de la chair des huîtres, suivie d’une PCR amplifiée qui a augmenté la sensibilité de la méthode RT-PCR standard.Norovirus RT-PCR et PCR mollusques et crustacés, une RT-PCR norovirus standard a été réalisée, comme décrit ailleurs Une étape PCR séminalisée a été Le produit de PCR primaire μL a été amplifié avec une amorce interne Ni et l’amorce inverse Mrb, en utilisant les mêmes conditions réactionnelles et les mêmes paramètres de cycle pour les cycles seulement. L’ensemble d’amorces Ni-Mrb amplifie a – La confirmation de la présence de norovirus et le typage des produits de PCR ont été réalisés par séquençage d’ADN du produit emboîté. Les produits de PCR ont été purifiés en utilisant le kit de purification QIAquick PCR Qiagen et ont ensuite été séquencés sur un séquenceur d’ADN ABI. Les séquences d’ARN polymérase d’Applied Biosystems Norovirus provenant d’échantillons d’huîtres et de fèces ont été comparées avec des séquences de référence de la base de données CaliciNet des Centers for Disease Control et de prévention et une séquence d’une éclosion de mollusques en Nouvelle-Zélande à l’aide de l’analyse BioNumerics logiciel Applied Maths pour enquêter sur les relations génétiques et un re représenté sous forme de dendrogramme Des contrôles négatifs et positifs ont été obtenus par l’extraction de l’ARN et les procédures de RT-PCR pour le contrôle de la qualité

Enquête environnementale

Inspections du site et retraçage local Des entretiens ont été menés avec les responsables des établissements de santé. Les agents de sécurité alimentaire des départements de santé de toutes les juridictions ont contacté les grossistes sur la distribution du produit ostréicole dans leur région ici. Food Standards Australia Nouvelle-Zélande a demandé au ministère de la Santé, du Travail et du Bien-être au Japon d’obtenir des informations sur le lieu de récolte et Après l’obtention des preuves épidémiques et de retraçage, les importateurs de viande d’huîtres en Australie ont été contactés par les autorités de sécurité des aliments de l’État et ont demandé de retirer tout produit restant avec le même numéro de lot.

Résultats

Enquête épidémiologique Un total de personnes a développé une gastro-entérite suite à la consommation d’huîtres. Les taux d’attaque dans les études de cohortes étaient de% et de%. La période médiane d’incubation pour toutes les épidémies était de h. courbe épidémique montre que l’épidémie du Territoire du Nord était une flambée de source continue, alors que l’épidémie de l’Australie-Occidentale était une figure d’origine ponctuelle

Tableau View largeTélécharger les caractéristiques démographiques et cliniques des éclosions d’infections à norvirus associées à la consommation d’huîtres en Australie, de novembre à janvier Tableau View largeTélécharger les caractéristiques démographiques et cliniques des éclosions d’infections à norovirus associées à la consommation d’huîtres en Australie, de novembre à janvier

Figure Vue largeTélécharger Diapositive épidémique des foyers d’infection à norovirus en Australie associés à la consommation d’huîtres, novembre-janvier Seuls les individus qui se sont présentés les vendredis et samedis dans le Territoire du Nord entre octobre et novembre ont été interviewés NT, Territoire du Nord; QLD, Queensland; Sam, samedi; WA, Western AustraliaFigure View largeTélécharger slide Courbe épidémique des foyers d’infection à norovirus en Australie associés à la consommation d’huîtres, novembre-janvier Seuls les individus qui se sont présentés les vendredis et samedis dans le Territoire du Nord entre octobre et novembre ont été interviewés NT, Territoire du Nord; QLD, Queensland; Sam, samedi; WA, Australie-OccidentaleLa durée de l’épidémie du Territoire du Nord, associée aux huîtres grillées, était de – semaines. Elle s’est produite pendant que les huîtres étaient servies au restaurant et a cessé le jour où les huîtres impliquées ont été rejetées. Les risques relatifs dans les épidémies du Territoire du Nord et de l’Australie occidentale ont montré une forte association entre la consommation d’huîtres crues et crues et la maladie. Dans le Territoire du Nord, le risque relatif de maladie associé à la consommation d’huîtres cuites était% IC, -; P & lt; Le risque relatif de maladie associé à la consommation d’huîtres en Australie-Occidentale était de% CI, -; P & lt; En analyse univariée de l’épidémie du Territoire du Nord, la consommation de poulet, de nouilles ou de crevettes était associée à la maladie En Australie occidentale, la consommation de rouleaux de saumon était associée à la maladie, tandis que la consommation de caramel La consommation d’huîtres était considérée comme n’étant plus statistiquement significative, car l’analyse univariée était confondue par la consommation d’huîtres. Deux cas secondaires dans le Territoire du Nord sont survenus chez des enfants ou des membres de la famille qui n’ont pas participé à l’enquête. restaurant; Norovirus a été détecté à partir de spécimens fécaux provenant de cas en Australie-Occidentale, cas du Territoire du Nord, et cas d’huîtres du Queensland provenant de l’épidémie du Territoire du Nord ont été initialement envoyés à des laboratoires australiens, mais négatifs pour le norovirus. La figure montre la relation génétique entre les séquences de référence de norovirus et les séquences de norovirus des huîtres et des échantillons fécaux dans la région de l’ARN polymérase du génome du norovirus. Le séquençage a montré une gamme de génotypes présents dans les échantillons fécaux, y compris GI /, GI /, GII / ,,, GII / et GII / Trois spécimens de selles contenaient plusieurs souches de norovirus L’analyse des séquences de norovirus de l’échantillon d’huîtres a montré une figure GII / souche

Figure View largeTélécharger la diapositive Analyse des souches de norovirus identifiées dans les échantillons fécaux et d’huîtres associés à des éclosions d’infections à norovirus et à des souches de référenceFigure Vue largeTélécharger Diapositive Analyse des souches de norovirus identifiées dans les échantillons fécaux et d’huîtres associés aux éclosions d’infections à norovirus et aux souches de référenceEnvironnement ou des maladies chez les membres du personnel ont été identifiées lors des inspections et des entrevues avec le personnel des lieux de préparation des cocktails et des repas des huîtres. Différentes marques de viande d’huître ont été impliquées dans chaque flambée et chaque marque a été fournie par un importateur australien différent. Santé, Travail et Bien-être au Japon ont indiqué que les différentes marques d’huîtres étaient fournies par une seule entreprise de transformation qui avait récolté chaque lot de la même zone de récolte au Japon en février. La viande restante d’huîtres du même lot était volu Cependant, un retrait systématique du produit à travers l’Australie n’a pas eu lieu avant que des signes microbiologiques de norovirus aient été trouvés dans les huîtres, date à laquelle la plus grande partie du produit incriminé a été vendue.

Discussion

Les produits d’huîtres restent difficiles malgré l’introduction des méthodes PCR, car le norovirus possède un génome viral variable qui rend difficile le développement d’un test de détection générique unique Le norovirus humain n’a pas été cultivé en culture cellulaire; par conséquent, la normalisation, l’inhibition des enzymes, le faible nombre de copies virales et les résultats de tests faussement négatifs peuvent rendre difficile la détection du norovirus dans les huîtres La PCR par PCR, plus sensible que la PCR standard, était nécessaire pour détecter le norovirus de l’huître Une tentative antérieure avec utilisation de PCR nichée, mais menée par un laboratoire ayant une expérience limitée dans le traitement de ces échantillons, a échoué. Ceci souligne la nécessité pour les laboratoires de traiter régulièrement les échantillons pour s’assurer que la qualité et la sensibilité des tests sont atteintes. En utilisant des méthodes de PCR plus sensibles, certains chercheurs ont montré des taux plus élevés de contamination des huîtres De nombreuses souches de norovirus ont été détectées à partir de spécimens fécaux et de lots de chair d’huîtres L’isolement de plusieurs souches de norovirus a déjà été Le norovirus a été séquencé suite à des éclosions de gastroentérite au Japon et a révélé que toutes les éclosions liées aux mollusques étaient associées à de multiples génotypes. Les huîtres sont des organismes filtreurs et elles concentrent les virus entériques lorsqu’elles sont cultivées. Dans notre étude, la source de contamination fécale dans la zone de récolte n’a jamais été identifiée, mais une étude précédente , menée au Japon, a montré que les huîtres destinées à la consommation crue et récoltées dans les mois de janvier ou février étaient fortement contaminés par diverses souches de norovirus La contamination des huîtres au Japon est un problème permanent, avec des données de surveillance sur une période de mois montrant que% des éclosions de norovirus d’origine alimentaire étaient liées à la consommation d’huîtres . réduire l’infection à norovirus suite à la consommation d’huîtres par l’utilisation de l’eau r essais sur le site de récolte, lavage des huîtres et impression des conseils de cuisson sur l’emballage Aucune de ces mesures n’a été efficace pour prévenir ces foyers en Australie L’inactivation des norovirus varie selon la méthode de cuisson et la température interne de l’huître Norovirus résistant à la chaleur , avec un virus viable survivant après avoir chauffé à ° C pendant min Dans d’autres enquêtes épidémiques, les personnes mangeant des mollusques bien cuits ou trop cuits avaient un risque de maladie similaire à celui des personnes qui mangeaient des coquillages crus [, Il est probable que le temps et la température de cuisson requis pour inactiver le norovirus dans les huîtres peuvent rendre la nourriture désagréable pour les consommateurs Les restaurants et le grand public dans de nombreux pays supposent que les huîtres sont consommées crues, et l’Australie et la Nouvelle-Zélande plusieurs éclosions liées à des produits de viande d’huîtres surgelés semblables, portant des étiquettes d’avertissement sur les emballages indiquant que le produit devrait être cuit avant mption ont été ignorés OzFoodNet, données non publiées; Des données inédites ont été rapportées sur la contamination des parcs à huîtres par des effluents d’eaux usées provenant d’embarcations à huîtres et de bateaux de plaisance aux États-Unis et en Nouvelle-Zélande. Dans de nombreux pays, les parcs à huîtres sont situés dans des baies et des estuaires. zones résidentielles Il est difficile pour les pays importateurs d’huîtres de s’assurer que les huîtres proviennent de zones où la contamination fécale ne peut pas se produire. En raison de notre enquête, le Service australien de quarantaine et d’inspection a restreint l’importation d’huîtres Les enquêtes soulignent l’utilité d’établir et de maintenir des réseaux de partage de l’information à l’échelle mondiale pour permettre l’échange rapide d’informations entre les organismes de réglementation des aliments dans le monde en période d’urgence en matière de sécurité alimentaire. L’Organisation mondiale de la Santé a récemment mis au point un nouveau réseau électronique international de responsables de la sécurité sanitaire des aliments pour permettre le partage d’informations sur la sécurité sanitaire des aliments et les incidents de contamination . Le Réseau international des autorités de sécurité sanitaire des aliments pourrait être un outil utile à l’avenir pour aider les pays à diffuser des informations sur les produits qui causent des maladies d’origine alimentaire. La communauté internationale de la santé publique doit continuer à améliorer ces réseaux et à en développer de nouveaux. l’approvisionnement alimentaire et les épidémies d’origine alimentaire internationales

Remerciements

Nous aimerions remercier Tom Parnell, conseiller agricole australien basé au Japon, et le personnel du ministère de la Santé, du Travail et des Affaires sociales au Japon pour leur aide dans cette enquête. Les autres membres de l’équipe d’enquête sur les épidémies étaient Leah Campbell et Peter Markey Xavier Schobben, Tracy Ward, Rachel Gaffney, Barbara Klessa et Kelly Monaghan Territoire du Nord; Walter Arrow, David Bond et Chantal Spittle Australie occidentale; Adele Flego Australie méridionale; Victor DiPaola Victoria; Marianne Tegal Nouvelle-Galles du Sud; Greg Smith Queensland; et Christopher Kenna, Craig Jamieson et Sophie Williamson du gouvernement australien Allamanda Faatoese et Joanne Hewitt Institut des sciences environnementales et de la recherche ont aidé à l’essai de norovirus des huîtres et de l’analyse de la séquence des norovirusFinancial Centre national d’épidémiologie et de santé de la population RJW et KSC et le programme OzFoodNet MDK, KD, RS et MS Les deux programmes de maîtrise en épidémiologie appliquée et OzFoodNet sont des initiatives du gouvernement australien, du ministère de la Santé et des conflits d’intérêts AgeingPotential Tous les auteurs: aucun conflit