Réplication peu fréquente des génotypes de Parvovirus B et Erythrovirus et parmi les patients infectés par le VIH avec l’anémie chronique

Nous avons examiné le rôle des génotypes d’érythrovirus et des erythrovirus dans la vie des patients immunodéprimés infectés par le VIH et présentant une anémie chronique. Nous avons analysé les échantillons de sérum des patients par un test de polymérase en chaîne en temps réel ultrasensible spécifique. impact clinique apparent L’anémie associée à l’érythrovirus est un événement extrêmement rare chez les patients infectés par le VIH

Parvovirus B PVB, en ciblant les progéniteurs érythroïdes humains, est responsable de l’anémie aiguë chez les patients atteints de troubles hémolytiques Pour les patients gravement immunodéprimés, y compris les patients infectés par le VIH avec un faible nombre de cellules CD, les cas et les cas d’anémie Récemment, des variants du PVB appartenant aux érythrovirus dans les génotypes de l’érythrovirus de la famille Parvovividae et, précédemment appelés variants de l’érythrovirus A et V, ont été décrits. Cependant, leur rôle pathogène a été L’anémie chronique est fréquente chez les patients infectés par le VIH et est un prédicteur d’une survie plus courte Le PVB est considéré comme une cause rare d’anémie aiguë ou chronique dans la population infectée par le VIH, malgré une séroprévalence élevée Cependant, dans l’étude réalisée par Naides et al in, de nombreux patients intolérants à l’azidoth L’AZT a été infecté par le PVB Des données récentes ont révélé que l’utilisation d’un test de détection de PCR en chaîne par la PVB polymérase hautement sensible, de faibles titres d’ADN PVB étaient associés à une anémie chronique légère à sévère pour une sélection de patients ayant reçu une transplantation rénale . le génotype de l’érythrovirus nouvellement décrit a été détecté chez des patients infectés par le VIH et atteints d’anémie chronique Nous voulions évaluer la prévalence de l’ADN érythroviral circulant chez des patients immunodéprimés infectés par le VIH et présentant une anémie chronique.

Méthodes

Les patients infectés par le VIH inclus dans l’étude Swiss HIV Cohort Study de janvier à avril ont été testés pour l’ADN érythroviral en utilisant une méthode de PCR en temps réel hautement sensible. anémie persistante plus élevée avec un taux d’hémoglobine & gt; g / dL [résultats consécutifs avec au moins mois entre chaque prélèvement], nombre de cellules CD immunosuppressives ⩽ cellules / μL pendant l’épisode d’anémie, et disponibilité d’au moins sérum ou plasma au moment de la détermination du taux d’hémoglobine ou entre Les patients ayant une exposition à la ribavirine à un moment quelconque entre les déterminations du taux d’hémoglobine ont été exclus Les patients exposés à des médicaments myélosuppresseurs n’ont pas été exclus, car ils pourraient être associés à une réactivation des érythrovirusDNA a été extrait du sérum ou plasma congelé avec le kit Qiagen DNA mini Qiagen PVB et le génotype de l’érythrovirus ou ADN ont été détectés et quantifiés par une PCR en temps réel ultra sensible ciblant le gène VP, une région bien conservée des génomes d’érythrovirus, en utilisant un volume d’extrait correspondant à mL de plasma en double, avec un supplément réaction dopée avec des copies d’ADN de PVB en tant que témoin d’inhibition Deux amorces directes B__F: ‘CTTACACAAGCCTGGG CAAGTTAG- ‘; et B__F: ‘-CTTACACAAGCCTGGGCGAGTTAG-‘; nM chacun et amorces inverses B__R: ‘-GGGGCCCAGCTTGTAGCTCATT-‘; B__R: ‘-GAGGCCCAGCTTGTAGCTCATT-‘; et B__R: ‘-GAGGCCCAGCTTGTAACTCATT-‘; nM chacun a été utilisé La sensibilité analytique, en utilisant une sonde de liant à base de rainure mineure de base B__P FAMTACCCGGTACTAACTAT-MBG-DQ; nM, un ABgene QPCR Rox mélange AB-b, et un cycle -s, ° C, -min, ° C sur une machine taqMan, était proche de la copie d’entrée de l’ADN viral le standard international de l’Organisation Mondiale de la Santé pour l’ADN du parvovirus B Pour chaque étalonnage, la linéarité de la relation ADN Ct / entrée a été vérifiée de, copies / réaction en utilisant des standards appropriés. De la population entière du patient, nous avons comparé les caractéristiques des patients avec la réplication de l’érythrovirus. Nous avons ensuite comparé le nombre de patients avec une exposition à l’AZT. Nous avons utilisé le test to pour comparer les variables qualitatives, et nous avons utilisé le test exact de Fisher comme approprié et le test non paramétrique de Mann-Whitney pour comparer variables continues Tous les tests statistiques ont été mis au point, et un seuil de% a été choisi comme seuil pour déclarer la signification statistique Nous sommes finalement retournés aux dossiers médicaux de p atients avec la réplication des érythrovirus pour déterminer les caractéristiques de l’anémie en recueillant des données biologiques supplémentaires, par exemple, le volume corpusculaire moyen, le nombre de cellules réticulocytaires, les niveaux de fer et de ferritine sérique

Résultats

Il y avait des patients qui remplissaient les critères d’inclusion À l’entrée d’étude,% étaient des hommes, l’âge médian était des années intervalle interquartile [IQR], – années, et% a rapporté l’utilisation intraveineuse de drogues Le nombre moyen de cellules CD était cellules / μL gamme, – cellules / μL, avec des patients ayant un nombre de cellules CD de & lt; cellules / μL Le taux médian d’hémoglobine était de g / dL, – g / dL, et les patients% ont été exposés à l’AZT au moment où des échantillons sanguins ont été prélevés.L’ADN a été détecté chez les patients% La charge virale en érythrovirus variait de détectable à un niveau très bas & lt; copies / ml en% des patients Aucune différence statistiquement significative dans les caractéristiques au moment de l’échantillonnage n’a été observée après la comparaison des patients avec la réplication érythrovireuse avec ceux sans réplication érythrovireuse Tableau La réplication érythrovirale n’était pas plus fréquemment détectée chez les patients avec un nombre de cellules CD de & lt ; cellules / μL [%] vs [%] de patients avec une réplication érythrovirale Il est à noter que la prévalence des utilisateurs de drogues intraveineuses semble être plus élevée chez les patients ayant une réplication érythrovireuse que chez les patients sans réplication érythrovirale [%] des patients vs [%] ; P = Cependant, les deux groupes de patients avaient un taux d’hémoglobine médian similaire au taux d’hémoglobine g / dL [IQR, – g / dL] pour les patients avec réplication érythrovireuse vs g / dL [IQR, – g / dL] pour les patients sans réplication érythrovirale; P = et une prévalence similaire d’anémie sévère [%] de patients avec une réplication de l’érythrovirus par rapport à [%] des patients avec une réplication de l’érythrovirus; P = L’ADN d’érythrovirus circulant a été détecté chez seulement% des patients sous AZT, et aucune différence statistiquement significative n’a été notée entre les patients avec un ADN érythroviral circulant et les patients sans données circulantes d’ADN érythroviral non représentées.

Tableau Caractéristiques de base des patients avec ou sans réplication de l’érythrovirus Caractéristique Patients avec une réplication de l’érythrovirus n = Patients sans réplication de l’érythrovirus n = P Âge, a – Sexe masculin Ascendance européenne blanche Utilisateur de drogue intraveineuse Hommes ayant des rapports sexuels avec d’autres hommes Nombre de cellules CD, μL – – Log médian Niveau VIH-ARN, a copies / mL – – Patients sans réplication du VIHa, b Testé positif pour HBsAg Testé positif pour anticorps anti-hépatite C Durée du SIDA, années – – Diagnostic du SIDAa, b Reçu ARTa Reçu ART avec Niveau d’hémoglobine AZTa, ag / dL – – Taux d’hémoglobine & lt; g / dL Caractéristiques Patients avec réplication érythrovirale n = Patients sans réplication érythrovirale n = P Âge, a – – Sexe masculin Ancestrale européenne blanche Utilisateur de drogue intraveineuse Hommes ayant des rapports sexuels avec des hommes Nombre de cellules CD, a cellules / μL – – Journal médian VIH- Niveau d’ARN, a copies / mL – – Patients sans réplication du VIHa, b Testé positif pour HBsAg Testé positif pour anticorps anti-hépatite C Durée du SIDA, années – – Diagnostic du SIDAa, b ARTa reçu ARTa avec AZTa Taux d’hémoglobine, ag / dL – – Niveau d’hémoglobine & lt; g / dL NOTE Les données ne sont pas% de patients ou valeur médiane intervalle interquartile [IQR] HBsAg, antigène de surface de l’hépatite B; ART, thérapie antirétrovirale; AZT, azidothymidine; Enfin, l’origine de l’anémie chez les patients avec une réplication érythrovirale était principalement considérée comme une carence en fer expérimentée ou une infection multifactorielle par le VIH avec ou sans traitement à l’AZT, la cirrhose , abus de drogues, insuffisance rénale chronique et / ou lymphome non hodgkinien aigu. Aucun de nos patients ne présentait d’aplasie pure des globules rouges.

Discussion

Nous avons constaté que le génotype PVB et le génotype érythrovirus ou la détection d’ADN étaient peu fréquents dans les échantillons de sang d’une grande cohorte de patients anémiques infectés par le VIH immunodéprimés, malgré l’utilisation de méthodes de PCR en temps réel hautement sensibles ici. anémie sévère transfusée avec réticulocytopénie Cette forme clinique d’anémie, qui nécessite des perfusions multiples d’immunoglobulines intraveineuses et l’instauration d’une thérapie antirétrovirale hautement active pour se rétablir, est rarement observée, malgré une séroprévalence élevée du PVB chez les personnes infectées par le VIH. % d’individus infectés par le VIH contre% d’individus dans la population générale de Suisse [-,] Les études antérieures qui ont essayé de détecter l’ADN de PVB circulant dans les échantillons sanguins de patients anémiques infectés par le VIH étaient limitées, car les études incluaient seulement des patients; ont été réalisées avant l’année, principalement en utilisant une PCR dot blot qualitative qui peut avoir une faible sensibilité ou une PCR PVB nichée; et n’a pas détecté les érythrovirus nouvellement décrits, tels que les génotypes d’érythrovirus et qui peuvent également être impliqués dans le processus d’anémie chronique chez les patients immunodéprimés. Notre étude, ciblant à la fois les génotypes PVB et érythrovirus et l’ADN avec PCR en temps réel , démontre que la prévalence de la réplication de l’érythrovirus était faible pour un grand nombre de patients anémiques infectés par le VIH, même pour les patients ayant un faible nombre de cellules CD De plus, la charge virale des échantillons positifs était faible. et sans signification clinique La prévalence de% observée dans notre population sélectionnée de patients infectés par le VIH et souffrant d’anémie chronique était proche de la prévalence de% observée chez les donneurs de sang américains, mais semblait supérieure à la prévalence de% observée en allemand et en Les donneurs de sang autrichiens dans – Il était à noter que, dans cette dernière étude, la plupart des patients avec l’ADN de PVB circulant présentaient une faible virémie. l charge, & lt; copies / mL Cette gamme de charge virale peut correspondre à une « poussière virale », probablement suite à une infection ancienne PVB symptomatique ou non Notre observation soutient l’hypothèse que l’anémie induite par le PVB est un événement extrêmement rare pour les patients infectés par le VIH et les érythrovirus Il est à noter qu’un faible nombre de cellules CD en soi ne semble pas suffisant pour permettre la réactivation du PVB Les patients qui étaient sous AZT au moment de l’échantillonnage n’étaient pas plus nombreux que les génotypes. Notre étude a quelques limites, y compris la conception transversale et l’absence d’indicateurs des circonstances et des caractéristiques des données d’anémie sur le nombre de réticulocytes, le volume corpusculaire moyen de rouge En conclusion, l’anémie associée au PVB est un événement rare chez les patients infectés par le VIH. Les patients infectés par le VIH et les génotypes d’érythrovirus n’ont aucun rôle pathogène à jouer dans le processus de l’anémie chronique chez ces patients. Cette étude ne soutient pas l’utilisation extensive de la PCR érythrovirale chez les patients infectés par le VIH et présentant une anémie chronique. décrit le contexte spécifique d’une anémie sévère avec une aplasie érythrocytaire pure qui n’a pas été observée dans notre étude

Étude de cohorte suisse sur le VIH

Les membres de l’étude suisse sur la cohorte VIH sont les suivants: M Battegay, E Bernasconi, JBöni, HC Bucher, P Bürgisser, A Calmy, S Cattacin, M Cavassini, R Dubs, M Egger, L Elzi, M Fischer, M Flepp, A Fontana, P Francioli P Président de l’étude suisse sur la cohorte VIH, H Furrer Président du Comité clinique et de laboratoire, CA Fux, M Gorgievski, HF Günthard Président du Conseil scientifique, HH Hirsch, B Hirschel, I Hösli, C Kahlert, L Kaiser, U Karrer, C Kind, T Klimkait, B Ledergerber, G Martinetti, N Müller, D Nadal, F Paccaud, G Pantaleo, A Rauch, S Regenass, M Rickenbach chef du centre de données, C Rudin président de la mère et Substudy Child, P. Schmid, D Schultze, J Schüpbach, R Speck, BM de Tejada, P Taffé, A Telenti, A Trkola, P Vernazza, R Weber R, et S Yerly

Remerciements

Nous remercions Nathalie Vallier et Cyril Andre pour leur aide financière Cette étude a été financée dans le cadre de l’étude suisse sur la cohorte VIH, soutenue par la Fondation nationale suisse de la science Conflits d’intérêts potentiels EB a reçu des honoraires ou des bourses de voyage d’Abbott, Boehringer Ingeldheim, Gilead, GlaxoSmithKline, Merck Sharp et amp; Dohme, Pfizer et Tibotec Tous les autres auteurs: aucun conflit